彭勇+陈伟宁
[关键词]结核；T SPOT.TB实验；心包积液
中图分类号：R542.1+2文献标识码：B文章编号：1009_816X（2014）03_0260_02
doi：10.3969/j.issn.1009_816x.2014.03.36结核感染T细胞斑驳实验（T_SPOT.TB）经过酶联免疫斑驳技能（ELISPOT）检测外周血中经结核菌特异性抗原刺激后开释γ干扰素的T细胞，确诊结核分枝杆菌感染具有较高的敏感性和特异性，本文首要针对我院收治的高度置疑结核性心包积液患者的外周血液行ELISPOT检测，评论该办法对结核性心包积液的确诊价值。
1材料与办法
1.1一般材料：选取我院2011年11月至2013年11月住院患者48例，依据以下规范，将患者分为两组：调查组拟诊结核性心包积液组21例，其间男12例，女9例，年纪16～72（38.9±13.5）岁，包含结核杆菌培育阳性、或结核杆菌培育阴性，但临床表现、印象学查看疑似结核，抗结核医治有用的患者；对照组27例，其间男15例，女12例，年纪14～75（48.3±18.7）岁； 其间7例非结核感染性渗出性心包积液、8例癌性心包积液（肺癌5例、淋巴瘤1例、乳腺癌2例） 、11例与心力衰竭有关、1例与肾上腺功用减退有关。一切病例均扫除HIV感染。
1.2办法：
1.2.1T_SPOT.TB检测：依据T_SPOT.TB试剂盒（Oxford Immunotec，Oxford UK）操作。肝素抗凝管收集6ml外周静脉血，样本室温（15～25℃）保存与运送，样本收集后尽早（24小时内）送到杭州市艾迪康医学查验中心。密度梯度离心法别离外周血单个核细胞（PBMCs）。洗刷后进行细胞计数。PBMCs和结核特异性抗原一起参加包被抗体的反响孔中，孵育过夜（37℃，5% CO2），效应T淋巴细胞开释细胞因子，与预包被的抗体结合。洗板，参加二抗，孵育1小时。洗板，参加底物显色液孵育7分钟。蒸馏水停止反响。一个斑驳代表一个效应T淋巴细胞。
1.2.2成果断定：依据T SPOT.TB试剂盒运用说明书。成果包含阴性对照、抗原A、抗原B和阳性对照。阳性成果参照以下规范：阴性对照孔斑驳数0～5个，且（抗原A或许抗原B）-（阴性对照孔斑驳数）≥6 。阴性对照孔斑驳数6～10个，且（抗原A或许抗原B）≥2×（阴性对照孔斑驳数）。假如上述规范不符合且阳性对照孔正常示检测成果为“阴性”。
1.3点评目标：选用敏感性、特异性、阳性猜测值（PPV）、 阴性猜测值（NPV）。
1.4计算学处理：使用SPSS 16.0版计算软件，率的比较选用卡方查验，对各组检出阳性率进行计算学剖析，P<0.05表明差异有计算学含义。
2成果
在调查组21例可疑结核性心包积液患者中，20例T_SPOT TB实验阳性，阴性1例；在对照组27例中T_SPOT TB实验阳性4例，阴性23例。T_SPOT.TB实验确诊结核性心包积液的敏感性为95.2%，特异性为85.2%，阳性猜测值为83.3%，阴性猜测值为95.8%。
3评论
肺外结核是指发生在肺部以外的全身其他脏器的结核感染，结核性心包积液属肺外结核感染导致的渗出性病变。国外材料显现肺外结核约占结核病的20%左右，在我国约占结核病的9.7%～11.8%，病死率占总结核病病死率的14.1%～17.6%[1]。现在确诊肺外结核仍存在必定困难，结核菌素实验（TST）虽然是现在筛查结核感染的首要的辅佐手法，但有许多局限性，Madariaga等[2]对47例痰菌阳性的结核患者进行检测，成果表明T_SPOT TB确诊活动性结核比TST的灵敏度高。现在，很多研讨证明，T_SPOT TB检测关于潜伏性结核感染及活动性肺结核具有较高的敏感性及特异性。Kim等[3]随诊72例疑诊肺外结核患者的前瞻性研讨显现，关于活动性肺外结核，T_SPOT.TB的敏感性为94%，TST敏感性为47%。相似TST，假如T_SPOT.TB的斑驳数在短时间内明显添加，则激烈提示体内活动性结核，此刻给予预防性医治十分必要[4]。
本文局限性在于例数较少，若精确点评外周血T_SPOT.TB检测在我国人群确诊心包结核使用价值，尚需求进行大样本、前瞻性行列研讨。此外，T_SPOT.TB成果的可靠性、稳定性与各个实验室的质量操控水平有关。
参考文献
[1]Mori T， Sakatani M， Yamagishi F， et al. Specific detection of tuberculosis infection： an interferon_gamma_based assay using new antigens[J]. Am J Respir Crit Care Med，2004，170（1）：59-64.
[2]Madariaga MG， Jalali Z， Swindells S. Clinical utility of interferon gamma assay in the diagnosis of tuberculosis[J]. Am Board Fam Med，2007，20（6）：540-547.
[3]Kim SH， Song KH， Choi SJ. Diagnostic usefulness of a T_cell_based assay for extrapulmonary tuberculosis in immunocompromised patients[J]. Am J Med，2009，122（2）：189-195.
[4]Pai M， Zwerling A， Menzies D. T_cell_based assays for the diagnosis of latent tuberculosis infection： an update[J]. Ann Intern Med，2008，149（3）：177-184.
（收稿日期：2013_12_26）
