刘飞 叶帆 杨晓文
摘 要：意图 经过检测上皮癌病理安排及正常卵巢安排中整合素α6β1和CD44V4表达状况，评论其表达特色与临床病理特征的相关性。办法 搜集2015年1月～2016年12月手术切除的20例正常卵巢安排、40例卵巢上皮良性肿瘤及65例卵巢上皮癌安排，使用免疫安排化学法检测整合素α6β1和CD44V4的表达水平，结合病理安排特征进行相关性剖析。成果 卵巢上皮癌安排中整合素α6β1和CD44V4的表达水平显着高于正常卵巢及上皮良性肿瘤安排，差异有统计学含义（P<0.05），且在不同病理分期及分解程度的卵巢上皮癌安排之间的差异有统计学含义（P<0.05）；但在不同安排学分型病理安排中差异无统计学含义（P>0.05）；α6β1和与CD44V4在卵巢上皮癌安排中的表达存在显着正相关（r=0.599，P<0.05）。定论 整合素α6β1和与CD44V4在卵巢上皮癌安排中高表达且有相关性，可作为卵巢上皮癌开展的分子标志物。
要害词：整合素α6β1；CD44V4；卵巢上皮癌
中图分类号：R737.3 文献标识码：A DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2018.04.020
文章编号：1006-1959（2018）04-0062-03
Abstract：Objective To detect the expression of integrin α6β1 and CD44V4 in epithelial carcinoma and normal ovarian tissues，and to explore the correlation between the expression of integrin α6β1 and clinicopathological features.Methods 20 cases of normal ovarian tissue，40 cases of ovarian epithelial benign tumor and 65 cases of epithelial ovarian cancer surgically resected from January 2015 to December 2016 were collected.The expression of integrin α6β1 and CD44V4 were detected by immunohistochemistry.Tissue characteristics for correlation analysis.Results The expression of integrin α6β1 and CD44V4 in ovarian epithelial carcinoma was significantly higher than that in normal ovarian and benign epithelial tumors，the difference was statistically significant（P<0.05），there was a statistically significant difference in epithelial ovarian cancer between different pathological stages and differentiation degree（P <0.05），but there was no significant difference in pathological histology among different histological types（P>0.05）.There was a significant positive correlation between α6β1 and CD44V4 expression in epithelial ovarian cancer（r=0.599，P<0.05）.Conclusion The expression of integrin α6β1 and CD44V4 in epithelial ovarian cancer are highly correlated and may be used as molecular markers for the development of epithelial ovarian cancer.
Key words：Integrin α6β1；CD44V4；Epithelial ovarian carcinoma
卵巢肿瘤是发病率仅次于子宫颈癌和子宫体癌的恶性肿瘤，致死率居妇科肿瘤之首，严重要挟女人健康[1]。卵巢恶性肿瘤以上皮癌最常见，清晰卵巢上皮癌的开展机制及前期确诊物对该肿瘤的医治有重要含义[2]。该类肿瘤较强的侵袭及搬运才能是临床医治困难的首要原因，细胞与基质的黏附效果是恶性肿瘤侵袭的重要进程[3]。整合素是首要的细胞黏附分子，整合素α6β1与CD44V4多表达于淋巴细胞和肿瘤细胞外表[4]，或许在卵巢上皮癌的开展中有重要效果。本文经过检测整合素α6β1和CD44V4表达水平，结合临床病理材料进行剖析，以评论整合素α6β1和CD44V4在卵巢上皮癌安排中的表达特色及其相关性。
1材料与办法
1.1一般材料 选取2015年1月～2016年12月萍乡市人民医院妇科行卵巢切除术切除的卵巢上皮癌安排标本65例，卵巢上皮良性肿瘤安排40例，并选取20例正常卵巢安排做对照；一切标本切除前均未承受放化療医治且经均经病理学专家盲法断定。卵巢上皮癌安排依据临床病例分型分类：依据病理分期（Ⅰ、Ⅱ期13例，Ⅲ、Ⅳ期34例）；安排学分型（子宫内膜样癌13例，粘液性囊腺癌20例，浆液性囊腺癌32例）；病理安排分解程度（低分解34例，中分解19例，高分解12例）。
1.2办法 ①首要试剂：兔抗整合素α6β1单克隆抗体、鼠抗CD44V4单克隆抗体，S-P试剂盒均为Sigma公司产品。②安排切片制作法：病理安排用10%甲醛室温固定24 h后用梯度浓度乙醇脱水后晒干除掉酒精，用二甲苯浸泡安排充沛通明；彻底通明的安排浸于混合蜡中，并放置于温箱中透蜡；最后向包埋柜中参加消融好的白腊充沛包埋；LEICA白腊切片机切片后烤干备用。③免疫安排化学染色检测：病理安排白腊切片惯例脱蜡后经梯度浓度酒精逐渐脱水；滴加适量过氧化氢溶液至切片以充沛消除内源性过氧化物酶活性；高温修正抗原后用山羊血清（1∶10正常山羊血清）关闭安排非特异性抗原；一二抗孵育后滴加HRP符号链亲和素工作液，37 ℃恒温孵育30 min进行DAB显色；经苏木素复染后脱水通明中性树胶封片调查。
1.3阳性成果鉴定规范 整合素α6β1表达水平依据阳性细胞数量与染色强度评分归纳断定：蛋白染色依据染得强度设定0～3分。阳性细胞数<10%计为0分；在10%～25%之间计为1分；25%～50%之间为2分；阳性细胞数>50%为3分。依据染色强度和阳性细胞数评分相加分级：≤2分记为低表达（-）；3～4分记为中表达（+）；5～6分则记为高表达（++）。
1.4统计学办法 使用SPSS19.0软件剖析数据，计数材料以（%）表明，选用？字2查验，变量间差异剖析选用Spearman等级相关剖析。P<0.05阐明差异具有统计学含义。
2成果
2.1不同病理安排中整合素α6β1与CD44V4表达水平比较 整合素α6β1在细胞中呈黄色或棕黄色颗粒，首要表达于卵巢上皮癌细胞胞浆中（72.31%），远高于正常卵巢与良性肿瘤安排中的表达水平，差异具有统计学含义（P<0.05）。CD44V4在卵巢上皮癌细胞胞浆中呈棕褐色颗粒，其表达水平显着高于正常卵巢与卵巢良性肿瘤安排，差异具有统计学含义（P<0.05）；而正常卵巢与卵巢良性肿瘤安排间的两者表达水平差异无统计学含义（P>0.05），见表1。
2.2整合素α6β1及CD44V4表达水平与卵巢上皮癌临床病理联系 整合素α6β1与卵巢上皮癌安排学分型无关（P>0.05），而与安排分解程度及临床分期有关，低分解组中整合素α6β1的表达显着高于高分解组，且跟着临床分期的晋级，整合素α6β1的表达也显着添加，差异均有统计学含义（P<0.05）。CD44V4表达水平与卵巢上皮癌安排分解程度及病理分期相同有关，跟着分解程度的进步其表达水平下降，一起表达水平跟着病理分期的添加而进步，差异均有统计学含义（P<0.05），但在不同安排学分型的病理安排中差异无统计学含义（P>0.05），见表2。
2.3整合素α6β1与CD44V4表达水平在卵巢上皮癌安排中表达的相关性 经Spearman剖析显现，整合素α6β1的表达水平与CD44V4呈正相关（r=0.599，P<0.05）。
3评论
全球癌症每年发病率整体呈上升趋势，其间卵巢恶性肿瘤是妇科常见致死性肿瘤，多为上皮性卵巢癌。我国上皮性卵巢癌的发病状况在近十几年来呈上升趋势，已然成为要挟女人健康的最大杀手[5]。而卵巢癌细胞较强的滋润和搬运才能为临床彻底治愈带来极大困难，尽管针对癌细胞滋润、搬运的分子机制已有较深入研讨，但要害有用的分子机制尚不清楚。因而寻觅上皮性卵巢癌发作开展的分子符号物，对进步患者的医治与预后有重要的含义。
卵巢上皮癌细胞的滋润与搬运触及多方面的机制，细胞与基质的黏附效果是恶性肿瘤侵袭的首要进程[6]。整合素与CD44分子作为首要的细胞黏附分子，参加多种搬运性肿瘤细胞表里基质的黏附效果，可经过多途径影响细胞，即能够改动基质成分调理细胞间的粘附效果，促进肿瘤细胞的滋润、搬运；又介导了肿瘤细胞的分解增殖中的信息传递，可作為靶向抗癌的新分子靶点。
整合素α6β1是由介导细胞与ECM之间黏附的α6亚基和β1亚基和构成的异二聚体，具有调理细胞的成长、凋亡、血管构成等功用[7]。研讨发现整合素α6β1在卵巢上皮细胞中广泛的表达，对卵巢安排的发育和功用起重要效果，其反常表达或许与卵巢肿瘤的发作开展相关。而近期对卵巢癌病理安排的检测研讨发现，整合素α6β1在不同病理分型的癌安排中的表达水平有差异，提示整合素α6β1与卵巢上皮癌有能够值得研讨评论的联系。本研讨发现在正常卵巢与卵巢良性肿瘤安排中α6β1蛋白表达水平较低，远低于卵巢上皮癌安排中72.31%的阳性率（P<0.05）；且与卵巢上皮癌安排分解程度及病理分期存在显着相关性，即低分解安排的表达高于高分解的表达，且跟着病理安排分期的进步而显着增高，差异均有统计学含义（P<0.05）；可是整合素α6β1与病理安排学分型无显着相关性，在子宫内膜样癌、粘液性与浆液性囊腺癌中表达差异无统计学含义（P>0.05）。以上提示整合素α6β1或许参加了卵巢上皮癌的发作开展进程，对其临床开展阶段的确诊有必定参考价值。
CD44V4分子作为CD44分子宗族的一种亚型，能够经过跨膜糖蛋白的方法介导细胞-细胞、细胞-ECM 的相互效果，在肿瘤细胞的黏附、肿瘤的滋润、搬运中发挥重要的效果[8]。本文评论CD44V4 的表达状况与卵巢不同安排临床病理特征的联系。成果显现CD44V4在卵巢上皮癌细胞胞浆中呈棕褐色颗粒，其表达水平显着高于正常卵巢与卵巢良性肿瘤安排（P<0.05）；而正常卵巢与卵巢良性肿瘤安排间的两者表达水平差异无统计学含义（P>0.05）。而卵巢上皮癌高-中分解组的表达低于低分解组的表达，Ⅰ～Ⅱ期组CD44V4的表达显着低于Ⅲ～Ⅳ期组，差异均有统计学含义（P<0.05）；但在子宫内膜样癌、粘液性及浆液性囊腺癌安排中差异无统计学含义（P>0.05）。以上充沛证明了CD44V4在卵巢上皮癌的发作开展中起重要效果。
整合素α6β1是一种黏附分子，其过量表达可使癌细胞与安排细胞的黏附力发作改动，为肿瘤细胞的搬运提供条件；CD44V4作为一种原癌基因参加肿瘤发作开展，诱导了其他原癌基因的高效表达，整合素α6β1与CD44V4一起参加肿瘤的滋润与搬运进程。本文经过检测卵巢肿瘤安排和正常安排中整合素α6β1、CD44V4的表达，发现整合素α6β1、CD44V4与卵巢上皮癌安排临床病理特色相关。一起，跟着整合素α6β1表达的增强，CD44V4的表达也有增强的趋势，其表达呈正相关，能够揣度这两种分子在卵巢上皮癌滋润、搬运这一杂乱的进程中有正协同效果。可是要更进一步的了解两者的详细效果机制，仍需进一步研讨评论。
参考文献：
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[8]雷燕，吳绪峰.CD44基因在卵巢癌中的表达及其与预后的联系[J].医学总述，2013（01）：155-158.
收稿日期：2017-8-23；修回日期：2017-9-21
修改/杨倩
